Вы здесь

Этиология и патогенез туберкулеза, свойства возбудителя

ВОЗБУДИТЕЛЬ ТУБЕРКУЛЕЗА И ЕГО СВОЙСТВА

Типичным представителем рода микобактерий являются ми-кобактер ии туберкулеза, имеющие в патологическом материале вид тонких, слегка изогнутых, гомогенных или зернистых палочек длиной от 0,8 до 3—5 мкм и шириной от 0,3 до 0,5 мкм. Форма и зернистость микобактерий хорошо видны в окрашенных препаратах. Особенности клеточной структуры микобактерий туберкулеза удается обнаружить при помощи таких методов цитологического исследования, как электронография, люминесцентная, фазово-контрастная микроскопия и др.

Усовершенствование способов фиксации, техники ультратонких срезов и увеличение разрешающей способности электронного микроскопа позволили установить ультраструктуру микобактерий и определить локализацию в ней отдельных органоидов. В бактериальной клетке дифференцируется клеточная мембрана, цитоплазма с отдельными органоидами и ядерная субстанция. До сих пор остаются неясными многие вопросы, связанные с ультраструктурой клетки, биохимическим составом и функциональным значением некоторых органоидов. Эти трудности в значительной мере обусловлены полиморфизмом микобактерий туберкулеза.

Кислотоустойчивые патогенные микобактерии, как и другие микроорганизмы, взаимодействуя с внешней средой, изменяются при меняющихся условиях среды. Изменения морфологических и культуральных, биологических свойств при этом могут быть как временными, так и постоянными. Последние могут быть связаны с изменением типа обмена веществ клетки, возникновением новых признаков, передающихся по наследству.



Туберкулез органов дыхания — научные исследования

Полиморфизм у микобактерий проявляется в образовании различных форм: нитевидные, актиномикотические формы, зернистые и кокковидные, некислотоустойчивые варианты. В. Н. Космодамианским (1960) было установлено, что некислотоустойчивые культуры также патогенны для экспериментальных животных, они могут вызывать у кроликов образование агглютининов и давать положительную реакцию агглютинации с сыворотками больных туберкулезом.

Интересной и все еще спорной проблемой биологии возбудителя является существование фильтрующихся форм. С 1910 г когда A. Fontes впервые доказал патогенность для животных фильтратов гноя от больных туберкулезом, многие исследователи подтвердили присутствие фильтрующихся форм микобактерий туберкулеза в различном патологическом материале полученном от больных туберкулезом, и в фильтратах живых культур путем пассажей на экспериментальных животных.

К измененным формам микроорганизмов, имеющим значение в патологии человека, относятся различные варианты, дефектные по клеточной мембране. Изменения или повреждения, связанные с дефектом, частичной или полной утратой клеточной мембраны, приводят к глубоким морфологическим и функциональным изменениям микроорганизма, результатом которых является возникновение протопластов, сферопластов, форм гете-роморфного роста и нестабильных или стабильных L-форм бактерий.

Многообразие форм возбудителя показывает возможности его адаптационной пластичности. С одной стороны, это многообразие может отражать различные стадии и фазы его развития, с другой — указывает на его филогенетические связи с другими представителями простейших растительных форм.

Химический состав микобактерий туберкулеза. В состав клетки входят вода (85,9%), белки, углеводы, липиды и минеральные соли. Липиды составляют от 10 до 40% сухого вещества. Они растворимы в спирту, эфире и хлороформе. Белковый компонент — различные туберкулопротеины — составляет 56% сухого вещества клетки. Туберкулопротеины разделяются по своим физико-химическим свойствам на 3 типа: с высокой молекулярной массой (32 000—44 000) — хорошо растворимые, биологически активные; со средней молекулярной массой (16 000) — менее растворимые, менее биологически активные; с низкой молекулярной массой (9000) — нерастворимые, наиболее тесно связанные с нуклеиновой кислотой, образующие комплексы — нуклеопротеиды.

В состав туберкулопротеинов входят почти все известные аминокислоты. Отмечены особенности аминокислотного состава у вариантов микобактерий, устойчивых к виомицину и капреоми-цину, стрептомицину, канамицину.

В микобактериях туберкулеза содержится до 15,3% углеводов большей частью в виде полисахаридов, свободных и в соединениях с фосфатидами и белками.

Минеральные вещества микобактерий туберкулеза составляют около 6% массы клетки. Это кальций, фосфор, магний, калий, железо, цинк и марганец в основном в виде соединений.

Предполагают, что туберкулопротеины являются основными носителями антигенных свойств микобактерий. Их введение может вызвать у животных состояние анафилаксии, нарастание фракции -(-глобулинов. Сенсибилизация, вызванная туберкуло-протеином, может передаваться пассивно. Туберкулопротеины не иммунизируют организм, но могут играть роль разрешающего фактора у животных, больных туберкулезом.

Полисахаридная фракция, по исследованиям Sabin и др., нетоксична, не обладает ни антигенными, ни сенсибилизирующими свойствами. Однако она проявляет высокую серологическую активность, обусловленную наличием в ней пентоз, вследствие чего способна вступать в реакцию преципитации с сывороткой больных туберкулезом.

Из липидных фракций наиболее активна фосфатидная. Она вызывает в интактиом организме специфическую тканевую реакцию с образованием эпителиоидиых и гигантских клеток Лангханса. Биологическая активность фосфатидов обусловлена присутствием фтиоидной кислоты. Активны также различные виды воска. По данным Sabin, при введении воска возникает лейкоцитарная реакция с образованием гигантских клеток. Чистая фосфатидная фракция и восковая фракция не способны сенсибилизировать нормальный организм. Однако, вводя их в комплексе с туберкулопротеинами, можно получить повышенную чувствительность к туберкулину замедленного типа.

Липидную фракцию связывают с кислотоустойчивостью ми-кобактерий, которая обусловливается миколовой кислотой. Однако это свойство предполагает также морфологическую целостность клеточной структуры, в первую очередь клеточной мембраны.

Липидная фракция, полученная при экстракции вирулентных микобактерий петролейным эфиром, получила название корд-фактора, который обусловливает склеивание микобактерий и образование роста в виде кос, а также является носителем вирулентных свойств микобактерий.

Питательные среды. Для нормального развития микобактерий требуются специальные питательные среды, содержащие углерод, азот, водород, кислород, фосфор, магний, калий, а так- " же железо, хлор, натрий, серу. Кроме того, для полноценного развития микобактерий туберкулеза, как и других микроорганизмов, необходимо наличие факторов роста, которые в минимальных количествах улучшают рост микобактерий на средах, содержащих основные питательные вещества. Факторы роста не входят в состав ферментных систем клетки, но используются для их построения. Известны факторы роста, родственные по своей природе витаминам группы В, ряд аминокислот, органических кислот и липидов. Все эти факторы содержатся в полноценных питательных средах — яичных, кровяных, картофельных.

Первичные культуры микобактерий, выделенные из патологического материала, особенно чувствительны к отсутствию фак~ торов роста. По-видимому, при вегетировании в тканях организма они теряют способность самостоятельно синтезировать такие вещества. Следовательно, для таких культур необходимы полноценные питательные среды. Лабораторные'штаммы, длительно пассируемые вне организма, вновь приобретают ауксо-трофность и способны к биосинтезу витаминоподобных факторов роста, поэтому хорошо культивируются на синтетических средах.

Для культивирования и дифференциации микобактерий туберкулеза используется большое количество разнообразных по составу и консистенции питательных сред. По составу их можно разделить на три группы: среды, содержащие глицерин; белковые среды (сывороточные, яичные, желтковые); синтетические (безбелковые) среды. Более полноценными являются смешанные среды, которые применяют для выделения культур из патологического материала. По консистенции среды делят на твердые, полужидкие и жидкие. Наиболее употребительны яичные среды Левенштейна-йенсена, Петраньяни, Гельберга, Калфина, Мордовского, Финна, Аникина, агаровые среды Миддлбрука, синтетические и полусинтетические среды Сотона, Дюбо, Школьниковой, Шулы и др.

При культивировании микобактерий на питательных средах большое значение имеет концентрация в среде водородных ионов (рН). Наилучший рост культур отмечается при рН 6,8—7,2. Микобактерии могут расти при более кислой реакции (рН 5,5) и при более щелочной (рН 8,0), однако менее интенсивно. Во время роста культуры микобактерий туберкулеза рН среды может изменяться в зависимости от вида микобактерий и состава среды. Температурные границы роста микобактерий находятся между 29 и 42°С, однако оптимальной температурой является 37—38 °С.

Что нужно знать о туберкулезе

Ферментативная активность. Микобактерии туберкулеза для синтеза белков клеточной мембраны, цитоплазмы и органоидов и для биоэнергетических процессов используют различные органические соединения, что указывает на их значительную и разнообразную ферментативную активность. В культуре микобактерий были обнаружены ферменты аминотрансферазы, эсте-разы, трегалазы и ферменты типа амидаз. Активность этих ферментов может служить целям групповой дифференциации кислотоустойчивых сапрофитов. Так, фермент уреаза у сапрофитных штаммов осуществляет гидролиз мочевины менее чем за 6 ч; у вирулентных штаммов этот процесс занимает в 2 раза больше времени. Для кислотоустойчивых сапрофитов специфична формамидаза, катализирующая распад формамида с образованием аммиака. У микобактерий туберкулеза и атипичных микобактерий этот фермент не обнаружен.

Как известно, внутриклеточное дыхание микобактерий осуществляется оксидоредуктазами. К этой большой группе окислительно-восстановительных ферментов относятся дегидрогена-зы, оксидазы, а также каталаза и пероксидаза. Особый интерес представляют каталаза и пероксидаза, поскольку с ними интимно связаны такие биологические свойства микобактерий туберкулеза, как вирулентность и лекарственная устойчивость к препаратам группы гидразидов изоникотиновой кислоты. Оба они относятся к железопорфирино-вым ферментам и катализируют ряд процессов переноса электронов между окисляемым субстратом и восстанавливаемым кислородом. У всех аэробных микроорганизмов завершающим продуктом окислительно-восстановительных процессов является перекись водорода. Каталаза расщепляет перекись водорода на воду и кислород. Пероксидаза катализирует окисление перекисью водорода ряда фенолов и ароматических аминов.

Установлены различия в физико-химических свойствах ка-талазы у различных видов микобактерий. Так, термостабильность каталазы отмечена у атипичных микобактерий и кислотоустойчивых сапрофитов. Она менее устойчива к температурному фактору у микобактерий туберкулеза, что используется для их дифференциации. Имеются наблюдения о более тесной связи между пероксидазной активностью и устойчивостью микобактерий к изониазиду. При этом подчеркивается, что потеря пероксидазной активности изониазидустойчивыми микобактериями является более характерным признаком, чем потеря каталаз-ной активности.

Дыхание. Для нормального развития микобактерии туберкулеза нуждаются в кислороде, поэтому их относят к аэробам. Большинство исследователей считали возбудителя туберкулеза абсолютным аэробом. Работы Л. М. Моделя и др. показали возможность роста микобактерий туберкулеза при недостатке или отсутствии кислорода (глубинный рост под масляным слоем). Это обстоятельство позволяет рассматривать микобактерии туберкулеза как факультативные аэробы. Однако вопрос о факультативной аэробности возбудителя остается до сих пор не решенным. Исследователи при конструировании новых питательных сред придерживаются принципа максимальной аэрации растущей популяции.

Размножение. Рост культуры микобактерий туберкулеза в обычных условиях в тканях организма и на питательных средах происходит в основном путем простого деления клетки. При электронно-микроскопическом исследовании установлено, что деление начинается с двустороннего вдавления цитоплазмати-ческой мембраны в цитоплазму. При соединении этих перегородок образуются дочерние особи. Известен и более сложный цикл деления микробной особи — почкование. На определенном этапе крупное гранулярное образование на полюсе клетки, окруженное небольшой частью протоплазмы, спускается к периферии клетки, образуя выпуклость на поверхности клеточной мембраны. В дальнейшем бугорок увеличивается и отпочковывается от материнской клетки в виде образования кокко-видной формы.

Одним из возможных, но еще не доказанных способов размножения микобактерий считается спорообразование. При этом в цитоплазме клетки, по мнению некоторых авторов, происходит увеличение нескольких шаровидных структур, имеющих вид зерен, и медленное исчезновение цитоплазмы. Зерна освобождаются из клетки и могут в дальнейшем прорастать в новые особи. Такой способ размножения роднит микобактерии с акти-номицетами. Размножение микобактерий туберкулеза происходит медленно. Цикл простого деления материнской клетки на две дочерние занимает от 20 до 24 ч. Микроскопически видимый рост микроколоний на жидких средах можно обнаружить на 5—7-й день, видимый рост колоний на поверхности твердой среды — на 12—20-й день.

Одним из характерных свойств возбудителя туберкулеза является его способность изменяться под воздействием внешних факторов. Помимо уже описанных морфологических, тинктори-альных и физиологических особенностей, у микобактерий туберкулеза отмечаются более глубокие изменения, касающиеся биологических свойств при сохранении ими в некоторых случаях морфологической общности. Последние являются следствием длительного процесса адаптации и селекции в специфических условиях, которые привели к стойкому изменению метаболизма клеток микроорганизма. В части случаев эти изменения закреплены генетически в таксономически обособленных видах микобактерий: человеческих, бычьих, птичьих, нетуберкулезных (атипичных). В части случаев они представляют собой варианты видов, стойко сохраняющие приобретенные свойства (БЦЖ и другие слабовирулентные и авирулентные штаммы). В большинстве случаев изменения, возникающие под влиянием изменившихся условий, не столь стабильны и могут реверсировать при исчезновении вызвавших их причин. К такой форме изменчивости можно отнести нестабильные L-формы микобактерий, лекарственную устойчивость мнкобактериальной популяции к некоторым туберкулостатическим препаратам с изменением степени вирулентности культуры при сохранении основного качества — патогенности.



Виды микобактерий и их дифференциация. Основным признаком, по которому микобактерии были отнесены к тому или другому виду, является различная патогенность их для разных видов животных и для человека. Среди патогенных микобактерий различают четыре вида: М. tuberculosis — возбудитель туберкулеза человека, М. bovis — возбудитель туберкулеза рогатого скота, М. avium — возбудитель туберкулеза птиц, М. microti (OVS, или Oxford vole strain) — возбудитель туберкулеза полевых мышей. Последний вид некоторые исследователи рассматривают как вариант бычьего, адаптировавшийся в организме полевой мыши.

Между отдельными видами микобактерий наблюдаются переходные формы.

Микобактерии различных видов имеют ряд морфологических, культуральных, биохимических и биологических особенностей, которые позволяют дифференцировать их друг от друга. Существует мнение, что микобактерии бычьего вида имеют морфологические отличия от человеческих—-меньшую длину тела микроба, меньшую его фрагментацию.

Предложен ряд питательных сред, на которых дифференциация микобактерий проводится в зависимости от изменения окраски среды (среды с бромкреазоловым красным, феноловым красным и др.). характера роста. Однако морфологические и культуральные различия не позволяют с полной достоверностью дифференцировать эти виды. Более четкая их дифференциация возможна с помощью биологических методов, основанных на неодинаковой чувствительности лабораторных животных к человеческим и бычьим микобактериям туберкулеза. Наилучшей моделью для этого метода оказались кролики, заражение которых культурой бычьего вида внутривенно в дозе 0,01 мг вызывает генерализованный туберкулез и гибель животных через 1—2 мес. Кролики, зараженные культурой человеческого вида, редко погибают в тот же промежуток времени. При вскрытии погибших животных обнаруживают диссеминированные очаги поражения в легких или почках, но иногда поражение отсутствует. Однако биологические методы в ряде случаев не позволяют провести типиро-вание микобактерий туберкулеза, особенно при наличии изо-ниазидоустойчивых штаммов.

Важным тестом для идентификации микобактерий человеческого и бычьего видов является ниациновый тест (проба Кон-но), основанный на свойстве человеческих микобактерий продуцировать значительно больше ниацина, чем микобактерии бычьего вида.

По мнению Я. А. Благодарного, достоверные данные о принадлежности микобактерий к тому или иному виду можно получить только при помощи комплексного исследования. Микобактерии человеческого и бычьего видов могут вызывать заболевание туберкулезом не только у человека, но и у крупного рогатого скота, овец, коз, свиней, верблюдов, реже у лошадей, собак и кошек.

Среди известных в настоящее время антропозоонозов самым распространенным является туберкулез. Заболевают им практически все позвоночные животные. Известно 54 вида млекопитающих, у которых установлен туберкулез.

Микобактерии млекопитающих не вызывают заболевания у кур и других домашних птиц, однако известны единичные случаи заражения ими попугаев и канареек. В то же время микобактерии птичьего вида могут быть причиной заболевания у человека и животных, однако наиболее восприимчивы к этому виду микобактерий куры. Особенностью культур птичьего вида является влажный, гладкий и довольно быстрый рост на питательных средах при 37 °С, но возможен рост и при 40—43 °С (температура тела птиц). В микроколониях они не образуют характерных кос, каталазоположительны, устойчивы к большинству химиотерапевтических препаратов.

В последнее время в литературе все чаще появляются сообщения о заболеваниях (микобактериозах), вызываемых атипичными (нетуберкулезными) микобактериями, представители которых выделены в отдельную категорию, весьма неоднородную как по происхождению, так и по свойствам. Объединяющим фактором является кислотоустойчивость. В связи с этим вопрос о происхождении и характере атипичных микобактерий остается нерешенным.

Как проявляется туберкулез

По мнению многих авторов, атипичные микобактерии, во всяком случае некоторые из них, имеют связь с туберкулезной инфекцией. В настоящее время существует несколько классификаций. Классификации, предложенные Bergey, а также Карpler с соавт. и А. И. Каграмановым, учитывают генетическое родство атипичных микобактерий с микобактериями туберкулеза и их патогенность. Наиболее распространенной рабочей классификацией атипичных микобактерий остается их группировка по Runyon, который выделил 4 группы. Группа I — фотохромогенные микобактерии, характерным признаком которых является пигментация колоний после экспозиции культуры на свету. Представителем этой группы является М. kansasii. Группа II — скотохромогенные. Отличительной особенностью их является образование желто-оранжевого пигмента в темноте. Это самая большая группа среди атипичных микобактерий (60—70%), к представителям которой относят М. aquae, М. scrofulaceum. Группа III — нефотохромогенные. Представители этой группы имеют слабую пигментацию или не пигментируются. К ним относят М. xenopei и др. Группа IV —быстро растущие, к которым относятся исключительно кислотоустойчивые сапрофита.

Изучение патогенетической роли атипичных микобактерий в клинике легочных и внелегочных заболеваний показало, что наиболее частым этиологическим фактором микобактериозов являются микобактерии III группы, реже I группы и еще реже II и IV групп.

Основной видовой признак микобактерий туберкулеза — патогенность, т. е. способность жить и размножаться в тканях живого организма и вызывать специфические ответные реакции, приводящие к определенной нозологической форме патологии — туберкулезу. Как уже было сказано выше, микобактерии туберкулеза патогенны для многих видов животных и человека. Наиболее восприимчивыми к заражению считаются морские свинки, которых применяют в качестве модели для биологической пробы при диагностике туберкулеза. Однако в настоящее время имеется большое количество штаммов микобактерий туберкулеза, различающихся по степени своей патогенности, т. е. по вирулентности. Следовательно, вирулентность является индивидуальным признаком отдельного штамма микроба и характеризуется интенсивностью размножения микроорганизма в тканях. Вирулентность микроорганизмов нельзя расценивать независимо от реакции макроорганизма. Это двухкомпонентная биологическая система. От изменения каждого составляющего компонента будет зависеть исход этого сопряженного процесса. Таким образом, исход инфекции может быть обусловлен вирулентностью, количеством и способом попадания микобактерий, восприимчивостью и индивидуальной резистентностью макроорганизма.

Высоковирулентные микобактерии туберкулеза у чувствительных к ним животных быстро размножаются в организме, не разрушаются фагоцитами, вызывают прогрессирующее образование туберкулезных очагов, приводящее в дальнейшем к неизбежной гибели животных. Слабовирулентные микобактерии также могут размножаться в организме, но они захватываются фагоцитами и разрушаются ими. Образующиеся специфические очаги подвергаются обратному развитию, животное не погибает. Вирулентность не является постоянным свойством. Она может изменяться у отдельных штаммов. Так, свежевыделенные из патологического материала микобактерии туберкулеза, как правило, более вирулентны, чем лабораторные штаммы, длительно содержащиеся на искусственных питательных средах. Для оценки вирулентности были предложены биологический метод (классический) и биохимические тесты. Последние основаны на установленном факте взаимосвязи корд-фактора микобактерий и их вирулентности, т. е. цитохимических реакциях.

Лекарственная устойчивость микобактерий туберкулеза. Возникновение устойчивых к антибактериальным препаратам вариантов — закономерное явление, основной биологический закон, выражение приспособления видов к окружающей среде. В литературе сформировались две теории сущности лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза. Теория адаптации предполагает изменения свойств микроорганизма, адекватные изменению окружающей среды. Соответственно развитие лекарственной устойчивости микобактерий расценивается как проявление одной из форм изменчивости бактериальной клетки под влиянием химиопрепаратов. Теория спонтанных мутаций предполагает существование устойчивых мутантов в популяции микобактерий. При этом антибактериальные препараты могут выступать или в качестве факторов дальнейшей селекции резистентных особей или, по мнению некоторых исследователей, в качестве мутагенов.

Лекарственная устойчивость микобактерий туберкулеза возникает ко всем химиотерапевтическим средствам и антибиотикам. Сложность и многообразие химической структуры существующих противотуберкулезных препаратов ни в коем случае не дают основания думать об одинаковом механизме их биологического действия. Изучение биологических особенностей, ферментативной активности, химического состава лекарственно-устойчивых вариантов в сравнении с чувствительными, генетически однородными микобактериями позволило выделить несколько основных механизмов, обусловливающих резистентность бактериальной клетки к данному антибактериальному агенту:

  • 1) появление нового пути обменных процессов, обходящего блокированное обменное звено;
  • 2) увеличение продукции метаболита — антагониста данного ингибитора;
  • 3) увеличение продукции фермента, который блокируется данным препаратом;
  • 4) снижение необходимости в продуктах ингибирующей мета-болитной системы;
  • 5) увеличение расщепления ингибитора;
  • 6) образование измененного фермента, который слабее ингиби-руется данным препаратом;
  • 7) уменьшение проницаемости бактериальной клетки в отношении данного вещества.

Все эти процессы могут происходить за пределами бактериальной клетки, на уровне клеточной мембраны и внутри бактериальной клетки.

Установлены характерные особенности вариантов микобактерий туберкулеза, устойчивых к различным противотуберкулезным препаратам. Варианты, устойчивые к стрептомицину, по своему морфологическому виду, строению колоний почти не отличаются от чувствительных к нему. Иногда появляется пигментация колоний. Микобактерии полностью сохраняют вирулентность и антигенную структуру. Однако они изменяют ферментативную активность и обладают пониженной способностью синтезировать инозит. В. И. Голышевская и И. И. Фадеева обнаружили значительно повышенную активность ас-партат- и валинаминотрансфераз, уменьшение переаминирова-ния лейцина и отсутствие аланинаминотрансферазы. По данным Н. В. Козловой, изменен аминокислотный состав резистентных к стрепотомицину микобактерий.

Варианты, устойчивые к изониазиду, могут уменьшать кис-лотоустойчивость, снижать или полностью терять вирулентность по отношению к морским свинкам. Одновременно с этим снижается активность каталазы и пероксидазы. По мнению S. Samara, потеря пероксидазной активности изониазидоустойчивыми штаммами является более характерным признаком. Что касается активности ферментов переаминирования, то отмечено более активное переаминирование валина за счет уве-тичения активности валинаминотрансферазы.

Причины заболевания туберкулезом

Довольно скудные данные имеются в литературе о штаммах микобактерий, устойчивых к другим противотуберкулезным средствам: ПАСК, виомицину, канамицину, капреомицину, ри-фампицину, этамбутолу, тиоамидам, тиокарбанилидам и цик-лосерину. Известно, что вирулентность канамицино- или кап-реомициноустойчивых вариантов полностью сохраняется, а вио-мициноустойчивых микобактерий — может снижаться в зависимости от штамма. Данные о вирулентности микобактерий туберкулеза, устойчивых к ПАСК, противоречивы. По мнению Б. Я. Стукаловой, Р. А. Радкевич, David, Alimquer и др., устойчивость микобактерий к ПАСК не влияет на их вирулентность. Однако Murata и соавт. отметили снижение вирулентности у вариантов, устойчивых к ПАСК. Установлено увеличение активности аминотрансфераз, ведущих к синтезу глутамииовой кислоты.



Противоречивы высказывания и о вирулентности рифамтг-циноустойчивых вариантов микобактерий. Одни авторы [Meis-sner, Schroder, и др.] сообщают о полном сохранении или некотором снижении вирулентности рифампициноустойчивых микобактерий при сохранении ими каталазной активности, другие [Daddi et al., 1967; Lucchaesi, Mancini, 1971] установили более значительное снижение вирулентности таких штаммов для морских свинок, тогда как цитохимические показатели и жизнеспособность микобактерий не претерпели значительных изменений.

Кроме устойчивости микобактерий к противотуберкулезному препарату, возможно появление зависимости от него. Зависимость выражается в необходимости этого препарата для роста и развития культуры. Чаще этот феномен наблюдается в отношении стрептомицина. Установленная зависимость строго специфична и довольно стойка. Механизм ее возникновения точно не выяснен.

Предполагают стимулирующий эффект стрептомицина или использование антибиотика клеткой микроорганизма в качестве метаболита.

Устойчивость микобактерий туберкулеза к внешним воздействиям. Микобактерии туберкулеза обладают значительной устойчивостью к различным физическим и химическим агентам, холоду, теплу, влаге и свету. В естественных условиях при отсутствии солнечного света они могут сохранять свою жизнеспособность в течение нескольких месяцев. Высохшие микобактерии остаются патогенными для морской свинки в течение 1—1,5 года. В уличной пыли микобактерии сохраняются в течение 10 дней. На страницах книг они могут оставаться живыми в течение 3 мес, при рассеянном свете погибают через 1—1,5 мес. В воде микобактерии сохраняются очень долго (в течение 150 дней). Микобактерии туберкулеза выдерживают процессы гниения и могут несколько месяцев сохраняться в погребенных трупах.

В лабораторных условиях культуры микобактерий могут храниться без пересева в течение нескольких месяцев (даже год). При лиофилизации их в замороженном состоянии под вакуумом они могут оставаться жизнеспособными до 30 лет.

Исследование устойчивости микобактерий, находящихся в культурах и в различных выделениях больных туберкулезом, к различным физическим и химическим факторам тесно связано с практическими задачами дезинфекции патологического материала, жилищ и предметов. Культура микобактерий, облученная солнечным светом, погибает в течение 1,5 ч. Ультрафиолетовые лучи убивают микобактерии через 2—3 мин. Во влажной мокроте микобактерии погибают при кипячении в течение 5 мин, в высушенной мокроте — только через 45 мин.

Микобактерии туберкулеза довольно устойчивы к действию ионизирующей радиации. Так, облучение рентгеновскими лучами в течение 36 ч культуры H37RV слабо действует на ее жизнеспособность. Однако ультразвуковые волны разрушают клетки микобактерий. Микобактерии туберкулеза теряют способность к размножению под действием электромагнитных волн с частотой колебаний 2000 кГц. Обычные дезинфекционные агенты также слабоэффективны в отношении микобактерии туберкулеза Надежной дезинфекции мокроты больных туберкулезом можно добиться при применении препаратов, выделяющих свободный активный хлор (3-5% растворы хлорамина в течение 5 ч. 1—2% растворы хлорамина, активированные сульфатом аммония, в течение 3 ч, 10—20% хлорная известь в течение 2,5 ч. и др.).